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  • 2024

    12-9

    TOP-10電擊感受態(tài)細(xì)胞只能用于電擊轉(zhuǎn)化,不能用于熱激轉(zhuǎn)化。TOP-10來(lái)源于MC1061菌株,是目前實(shí)驗(yàn)室常用的感受態(tài)細(xì)胞之一,基因型與DH10B高度類似(DH10B為galE15型,而TOP-10為galU型)。操作說(shuō)明:一、0.1cm電擊杯和杯蓋從儲(chǔ)存液中拿出倒置于干凈的吸水紙上5分鐘,待其瀝干水分,正置5分鐘,使乙醇充分揮發(fā),待乙醇揮發(fā)干凈立即插入冰中,壓實(shí)冰面,電極杯頂離冰面0.5cm以方便蓋上杯蓋,冰中靜置5分鐘充分降溫。二、取-80℃保存的TOP-10電擊感受...

  • 2024

    11-12

    質(zhì)粒pYES2的篩選標(biāo)志為URA,可用SD-URA板板進(jìn)行篩選。BY4742感受態(tài)細(xì)胞經(jīng)特殊工藝制作,pYES2質(zhì)粒檢測(cè)轉(zhuǎn)化效率104cfu/μgDNA。操作說(shuō)明:1、取一支無(wú)菌的1.5mlEP管,依次加入預(yù)冷的目的質(zhì)粒1-3µg,CarrierDNA10µl(95-100度5min快速冰浴,重復(fù)一次),100µl冰上融化的AH109感受態(tài)細(xì)胞,PEG/LiAc500µl,輕輕翻轉(zhuǎn)混勻6-8次;2、30℃水浴30min,每10m...

  • 2024

    11-6

    酵母感受態(tài)細(xì)胞是指通過(guò)物理或化學(xué)方法處理,使其在短時(shí)間內(nèi)能夠吸收外源DNA分子(如質(zhì)粒或基因片段)的酵母細(xì)胞。這些細(xì)胞通常處于一種“非自然”狀態(tài),能夠克服正常細(xì)胞膜的屏障,將外源DNA成功引入。廣泛應(yīng)用于基因克隆、蛋白表達(dá)、基因編輯、基因敲除等分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)。由于其在細(xì)胞工程中的重要性,如何有效地保存這些感受態(tài)細(xì)胞以保證其長(zhǎng)期的穩(wěn)定性和高效性,成為了研究人員關(guān)注的重要問(wèn)題。保存方法主要分為兩類:冷凍保存法和液氮保存法。這兩種方法在不同的研究環(huán)境下有各自的優(yōu)缺點(diǎn)。以下是常見(jiàn)的保...

  • 2024

    10-25

    細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)廣泛應(yīng)用于生物醫(yī)學(xué)研究、藥物開(kāi)發(fā)和生物制品生產(chǎn)中。然而,細(xì)菌和真菌的污染是細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中的一大挑戰(zhàn),可能導(dǎo)致實(shí)驗(yàn)結(jié)果失真、細(xì)胞生長(zhǎng)受阻,甚至導(dǎo)致實(shí)驗(yàn)的失敗。本文將探討如何有效預(yù)防和處理Hyclone細(xì)胞培養(yǎng)基使用過(guò)程中可能出現(xiàn)的細(xì)菌和真菌污染。一、細(xì)胞培養(yǎng)污染的來(lái)源1.外部環(huán)境:實(shí)驗(yàn)室空氣中存在的微生物、灰塵、化學(xué)物質(zhì)等都可能成為污染源。2.操作人員:操作人員的手部、衣物和呼吸中可能攜帶細(xì)菌和真菌,直接影響培養(yǎng)基和細(xì)胞的安全性。3.設(shè)備和耗材:細(xì)胞培養(yǎng)器皿、移液器...

  • 2024

    10-15

    Biospec玻璃珠在生物科學(xué)研究中被廣泛使用,尤其是在樣本處理、細(xì)胞破碎及其他實(shí)驗(yàn)應(yīng)用中。為了確保其性能,正確的儲(chǔ)存方式至關(guān)重要。儲(chǔ)存環(huán)境:1.溫度控制室溫儲(chǔ)存:一般而言,可以在室溫下儲(chǔ)存。避免低溫:盡量避免置于冰箱或冷凍柜內(nèi),因?yàn)榈蜏乜赡軐?dǎo)致物理性質(zhì)變化。2.濕度控制干燥環(huán)境:應(yīng)將儲(chǔ)存在干燥的地方,過(guò)高的濕度會(huì)導(dǎo)致吸濕和污染。防潮措施:可使用干燥劑(如硅膠包)放在儲(chǔ)存容器內(nèi),以保持環(huán)境干燥。容器選擇:1.儲(chǔ)存容器的材質(zhì)選擇合適的容器:推薦使用干凈的塑料或玻璃容器。避免使用...

  • 2024

    10-12

    培養(yǎng)基是指供給微生物、植物或動(dòng)物(或組織)生長(zhǎng)繁殖的,由不同營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)組合配制而成的營(yíng)養(yǎng)基質(zhì)。基本配置:1.配料配方換算→在容器中加入少量水(蒸餾水,自然水)→按照配方稱取各種藥品(依次加入)→加足所需水量(一藥一勺,取藥后立即蓋上瓶蓋)。2.溶解淀粉溶解:少量冷水調(diào)成糊狀。加熱溶解,特別是加有瓊脂的培養(yǎng)基,一定要煮沸,瓊脂的熔解溫度95-97℃,且需要邊加熱邊攪拌以防止燒焦。3.調(diào)PH用1N的鹽酸或1N的NaOH把培養(yǎng)基調(diào)節(jié)到所要求的值。4.過(guò)濾濾紙或棉花進(jìn)行過(guò)濾。(有時(shí)可以...

  • 2024

    9-23

    樣本密度分離液是根據(jù)物質(zhì)在液體中的密度差異進(jìn)行分離的一種液體。其基本原理是利用不同組分在液體中的浮力差異,使得密度較低的組分漂浮在液體表面,而密度較高的組分則沉入液體底部。這種方法常用于細(xì)胞分離、微生物培養(yǎng)、粒子分離等應(yīng)用。作為一種有效的分離工具,廣泛應(yīng)用于細(xì)胞、顆粒和其他樣本的分離。使用步驟如下:1、準(zhǔn)備工作在使用之前,需要進(jìn)行充分的準(zhǔn)備工作:.選擇適當(dāng)?shù)姆蛛x液:根據(jù)樣本的性質(zhì)(如細(xì)胞類型、顆粒大小等)選擇合適的密度分離液。.設(shè)備準(zhǔn)備:確保離心機(jī)、試管和其他實(shí)驗(yàn)器材清潔、干...

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